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 Anti-Tumor E ects of Sodium Meta-Arsenite in
Glioblastoma Cells with Higher Akt Activities

Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 8982 14 of 19
37 C for 15 min, washed extensively, reblocked with 5% non-fat milk, and then reprobed with another
antibody as described above.
4.6. Flow Cytometer Analysis
Cells were trypsinized and suspended in PBS containing 2.5 mM EDTA, 2.5 mM EGTA and 1%
BSA. For the measurement of mitochondrial membrane potential changes, cells were incubated with
20 nM 2 M JC-1 in PBS for 15？30 min at 37 C, followed by flow cytometer analysis (FACSCalibur;
Becton Dickinson Bioscience, San Jose, CA, USA). JC-1 is a lipophillic dye and it may be the most
sensitive indicator for mitochondrial membrane potential [24]. At low membrane potential, JC-1 occurs
as a monomer that emits green fluorescent, and at higher membrane potential JC-1 forms aggregates
that emit red fluorescence. The data were analyzed with Cell Quest Software (BD bioscience, San Jose,
CA, USA).

J. Mol. Sci. 2020, 19명 중 21, 8982 14명
37 C 15분 동안 광범위하게 세척한 후 5% 무지방 우유로 다시 밀봉한 후 다른 우유와 함께 재생산
위에서 설명한 대로 항체입니다.
4.6. 유량 세포계 분석
세포는 2.5 mMEDTA, 2.5 mMEGTA 및 1%를 포함하는 PBS에서 트립핀화되고 중단되었습니다.
BSA. 미토콘드리아 막의 전위 변화를 측정하기 위해, 세포는 다음과 같이 배양되었다.
37 C에서 15~30분 동안 PBS에서 20nM 2 MJC-1, 그 다음 흐름 세포계 분석(FACS 칼리버;
미국 캘리포니아주 산호세 소재 벡튼 디킨슨 바이오사이언스). JC-1은 립힐릭 염료로 가장 많을 수 있습니다.
미토콘드리아 막 전위에 대한 민감도 지표 [24] 낮은 막 전위에서는 JC-1이 발생한다.
녹색 형광을 방출하는 단량체로서, 높은 막 전위 JC-1 형태에서 집적된다.
붉은 형광을 내뿜습니다 이 데이터는 Cell Quest Software(BD 바이오사이언스, 산호세, Cell Quest Software)로 분석되었다.
CA, USA).

메타아르세나이트나트륨의 종양방지효과
Akt 활동이 높은 교모세포

J. Mol. Sci. 2020, 19명 중 21,8982 16명
불링게임, 미국) 밤새 4시. 아비딘-바이오틴 과산화효소 복합체가 준비되었다.
제조업체의 지침에 따라 적용(Vectstain Elite ABC 키트). 마지막으로 섹션
DAB/과산화수소 기판 용액에서 5분간 배양(에 따라 제조됨)
제조업체의 지침, Vectstain DAB 기판 키트, Vector Laboratories). 섹션이 장착되었습니다.
수용성 마운트(Vectashield, Vector Laboratories)에서 현미경으로 관찰(Olympus, Olympus,
일본 도쿄. IHC 얼룩의 정량화를 위해 세 개의 얼룩 필드가 무작위로 선택되었습니다.
각 구간 그런 다음 처리된 그룹 간의 평균 IOD(통합 광학 밀도) 수준은 다음과 같았다.
와 비교하여 분석을 위해 Image-J 소프트웨어가 사용되었습니다.
4.14. 면역 형광 분석
세포는 PBS에서 1% 파라포름알데히드로 4C에서 20분간 고정시키고 투과성 및 차단되었다.
상온에서 1시간 동안 PBS의 3% BSA에 있습니다. 그리고 나서 세포는 항 p53 항체로 배양되었다.
하룻밤 사이에 4C를 투여하고 알렉사 488 결합 항체를 1시간 동안 상온에서 배양했습니다
핵 염색을 위해 세포는 PBS에서 DAPI로 배양되었다. 세포는 코로컬을 사용하여 검사되었다.
현미경 검사(Zeiss, Jena, Germany)
4.15.통계분석
두 그룹 간의 비교는 학생의 t-test를 사용하여 수행되었습니다. 다중 그룹
비교 결과 모수 일원 분산 분석 후 임시 검사(Bonferroni)가 수행되었습니다.
정정). 데이터는 평균값과 표준 편차(오류 막대)를 나타냅니다.
세 가지 독자적 실험 

？ 5. 결론
교모세포종은 종종 PTEN 손실 또는 돌연변이와 관련이 있으며, 이는 AKT 활성화로 이어진다.
KML001, 나트륨 아르세나이트 유도 성장 억제 더 많은 교모세포선 광양증으로 인한 증가 억제
PTEN-야생형 세포보다 AKT 활성이 높은 PTEN 결핍 세포에서 민감하게 반응합니다. KML001
단백질의 AKT 저하를 통해 AKT를 비활성화합니다. 또한 체내 종양 퇴치 부위는 다음과 같습니다.
KML001은 정형외과적으로 이인공예 모델에서 관찰되었습니다. 이 데이터는 KML001이 될 수 있음을 나타냅니다.
PTEN 삭제/변화에 의한 Akt의 높은 활동에 따른 선택적 화학 치료제
교모세포종 암 환자의 경우
보조 자료: 다음은 http://www.mdpi.com/1422-0067/21/23/8982/s1에서 온라인으로 제공됩니다.
저자 기고문: E.J.L, J.Y.S, K.H.K, J.B.P. 및 D.H.K.는 실험을 설계, 수행 및 분석했습니다.
J.S.C.H.L.J.P.는 방법론적 조언을 하고 데이터를 분석했으며, Y.N.K.는 이를 설계하고 분석하였다.
실험, 원고 작성, 프로젝트 감독. 모든 저자가 출판물을 읽고 이에 동의함
원고의 판본
자금 지원: 이 연구는 국립암센터의 연구보조금으로 지원되었다.
1810931)과 대한민국 보건복지부 한국보건기술연구개발(HI17C0792).
승인: 우리는 한국 국립 암 센터의 유전자 핵심 시설에 감사한다.
제공 서비스
관심 충돌: 저자들은 이해 상충이 없다고 선언한다.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7729740/pdf/ijms-21-08982.pdf

 https://www.mdpi.com/1422-0067/21/23/8982/htm